Знайдення мощей преподобного Макарія Калязинського відбулося 26 травня 1521 року. Купець з міста Дмитрова, Михайло Воронков, пожертвував кошти на будівництво кам'яної церкви, замість застарілої дерев'яної, в Калязінському монастирі. Ігумен монастиря Іоасаф поставив хрест на місці, призначеному для вівтаря, і благословив копати рови під фундамент. Під час робіт було знайдено незайману труну, від якої виходило пахощі. Ігумен Іоасаф відразу пізнав труну засновника монастиря - преподобного Макарія, преставився в 1483 році. Братія монастиря і безліч народу, що зібрався звершили панахиду над перенесеною до храму труною. З цього дня від нетлінних мощів святого стали відбуватися зцілення. Про це було повідомлено Московському митрополиту Даниїлу (1522-1539), який скликав у Москві Собор і, докладно розглянувши свідоцтва про святість преподобного Макарія, встановив святкування новоявленому святому. Мощі були урочисто перенесені в храм в ім'я Пресвятої Трійці. Феодосієм з Твері була складена служба на набуття мощів. До 1547 року шанування святого Макарія здійснювалося тільки в його резиденції. На Московському Соборі 1547 року, за митрополита Макарія (1543-1564), преподобний Макарій Калязинський був зарахований до лику святих, пам'ять його в числі інших руських святих постановлено святкувати по всій Русі. Відомості про преподобного Макарія Калязинського поміщені також 30 березня, в день пам'яті спочинку святого.